洁净室（区）环境监测项目及指标要求

(一)、洁净室(区)环境监测项目及指标要求

本部分中关于洁净室(区)环境监测项目应依据《无菌医疗器具生产管理规范》(YY0033-2000)标准，第三方检测机构也应按照《无菌医疗器具生产管理规范》(YY0033-2000)标准出具洁净室(区)环境检测报告。

 1.温湿度和静压差

一般情况下，温湿度和静压差是日常监测项目，在产品生产过程中应随时检查温湿度、静压差是否在规定的范围内。

值得注意的是，温湿度的要求在《体外诊断试剂生产实施细则》中没有明确规定，主要考虑因体外诊断试剂的种类繁多，生产工艺过程中可能存在有在不同温度或湿度环境要求下进行生产的情况，如胶体金试剂、酶联免疫试剂的工序中可能存在的干燥环境，且《体外诊断试剂生产实施细则》中的第二十九条也规定了“对空气有干燥要求的操作间内应当配置空气干燥设备，保证物料不会受潮变质。应当定期监测室内空气湿度。”所以，如何具体规定洁净间里的温湿度，生产企业应充分考虑产品生产工艺的需要。

《无菌医疗器具生产管理规范》(YY0033-2000)中规定：空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5Pa，洁净室(区)与室外大气的静压差应大于10Pa。但要注意，对于同级别洁净室(区)内，针对不同生产工序也应区别对待，如注塑间与相邻同级别功能间应有压差梯度，以防止污染。

 2.风速和换气次数

风速的要求在《体外诊断试剂生产实施细则》中也没有明确规定，是考虑不同试剂的生产环境以及不同级别的洁净环境需要的风速有不同的要求。如阴阳性血清试剂的生产需在万级下进行生产，而金标试剂等则需在10万级洁净环境下生产，那么为达到万级或10万级的监控项目指标的要求(从体外诊断试剂生产实施细则附录A的第一条对万级和10万级的尘粒和沉降菌数的指标中可以看出，二者间存在明显的区别，而要达到这些指标，与换气次数即新送风量有密切的关系)，换气次数就有区别;而换气次数与风速间存在转换关系，则风速就有区别。所以，如何具体规定洁净间里的风速(换气次数)，满足其洁净级别的需要是首要因素。

换气次数与风速的转换关系如下：

换气次数(次/小时)=风速(m/s)×送风口面积(m2)×3600/房间容积(m3)

 3.尘埃颗粒数、沉降菌和浮游菌

《洁净厂房设计规范》(GB50073-2001)标准对洁净室(区)的尘埃颗粒数及微生物菌落数的检测都规定了相关的要求，正常情况下洁净室(区)状态一般分为空态、静态和动态三种：

空态：已经建造完成并可以投入使用的洁净室(区)。它具备所有有关的服务和功能。但是，在设施内没有操作人员操作的设备。

静态：各种功能完备、设定安装妥当，可以按照设定使用或正在使用的洁净室(区)，但是设施内没有操作人员。

动态：处于正常使用的洁净室(区)，服务功能完善，有设备和人员从事正常的生产工作。

洁净室(区)建设完工后应对整体工程项目进行验证，以确认是否达到规定的设计要求。无菌医疗器械生产洁净室(区)的验证通常是由安装确认、运行确认、性能确认组成的，其中设备安装、仪器仪表的校正属于安装确认，性能确认是作最后的判断。在生产环境验证中性能确认是对净化系统是否能达到规定的洁净级别做出判断;医疗器械工业洁净室(区)的洁净度主要包括尘埃和微生物两个方面，因此洁净度的测定主要是对尘埃粒子和微生物菌落数的测定。

(1)悬浮粒子的测定

悬浮粒子的测定可参见《医药工业洁净室(区)悬浮粒子的测试方法》(GB/T16292-2010)标准，其基本内容如下：

1)悬浮粒子的测定方法主要有显微镜法及自动粒子计数法。

a.显微镜法：显微镜法是用抽气泵抽取洁净室(区)内的空气，把在测定用的滤膜表面上捕集到的粒径中大于5μm的粒子，按悬浮状态连续计数的方法测定。用显微镜法测定的直径为粒子的最大直径。

b.自动粒子计数法：自动粒子计数法是把洁净室(区)中粒径大于0.5μm的粒子，按悬浮状态连续计数的方法测定。

2)悬浮粒子洁净度监测的采样点数目及其布置应根据产品的生产及关键工序设置。一般在高效过滤器末端层流罩下的工作区离地0.7～1m处设置测点即可。

3)悬浮粒子洁净度测定的最小采样量和最少采样点数目及洁净度级别的结果评定参见《医药工业洁净室(区)悬浮粒子的测试方法》(GB/T  16292-2010)标准的规定。

(2)微生物菌落数的测定

对微生物菌落数测定目的是确定浮游的生物微粒浓度和生物微粒沉降密度，以此来判断洁净室(区)是否达到规定的洁净度。因此微生物菌落数的测定有浮游菌和沉降菌两种测定方法。

1)浮游菌的测定

a.浮游菌的测定是通过收集悬浮在空气中的生物性微粒子，通过专门的培养基，在适应的生长条件下，让其繁殖到可见的菌落进行计数，从而判定洁净环境中单位体积空气中菌落数的多少。

b.浮游菌测定需有专门的采样器、真空抽气泵等设备，浮游菌采样器常用撞击法中的狭缝式采样器。

c.采用的浮游菌采样器必须要有流量计和定时器，并严格按仪器说明书的要求定期进行校验和操作。

d.浮游菌测定的采样点及数目与悬浮粒子测定相同，即在同悬浮粒子相同的测定点采样。

e.浮游菌测定的最小采样量和最少采样点数目及浮游菌结果评定参见相关标准的规定。

2)沉降菌的测定

a.沉降菌测定的设备主要是φ90′150玻璃培养皿和各种培养基，常用普通肉汤琼脂培养基。

b.沉降菌测定其培养皿应布置在具有代表性的地方和气流扰动最小的地方，其最少采样点数目见下表。